中國(guó)首次雞星狀病毒感染的血清學(xué)調(diào)查

薛佳*，韓濤a，徐美玉*，趙靜*，張國(guó)中*

*中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜禽診斷中心

a北京天之泰生物科技有限公司

摘要：

雞星狀病毒（CAstV）能引起以雞胚死亡率增加和孵化率下降為特征的白羽肉雞綜合征。本研究應(yīng)用ELISA方法對(duì)來(lái)自于中國(guó)21個(gè)省份1760份血清樣品進(jìn)行星狀病毒抗體的檢測(cè)。血清樣品來(lái)自于85個(gè)不同來(lái)源的群體，并且這些群體抗體全部有陽(yáng)性。總的血清學(xué)陽(yáng)性率為60.68%。隨著日齡的增加，其陽(yáng)性率從34.17%增加至74.44%。蛋雞、父母代蛋雞、肉雞、父母代肉雞和地方品種雞的陽(yáng)性率分別為70.17%、89.00% 、31.67%、59.05% 和45.79%。這些數(shù)據(jù)表明我國(guó)雞星狀病毒分布非常廣泛。這是中國(guó)第一篇關(guān)于雞星狀病毒血清學(xué)調(diào)查的研究。

星狀病毒為無(wú)囊膜單股正鏈RNA。整個(gè)病毒粒子大約7kb，包括了三個(gè)開(kāi)放閱讀框和一個(gè)PolyA尾巴。電鏡觀察病毒粒子25-35nm，呈星狀。星狀病毒屬于星狀病毒科，分為哺乳動(dòng)物和禽類(lèi)星狀病毒兩大類(lèi)，分別感染哺乳動(dòng)物和禽類(lèi)。資料顯示，星狀病毒可以感染超過(guò)80種哺乳動(dòng)物和禽類(lèi)。宿主暴露于兩類(lèi)病毒的環(huán)境中，這樣增加了物種間交叉感染的機(jī)會(huì)。有報(bào)道顯示，人接觸火雞后，人體內(nèi)火雞星狀病毒血清學(xué)轉(zhuǎn)陽(yáng)。最近，在家禽體內(nèi)發(fā)現(xiàn)一種類(lèi)似于哺乳動(dòng)物的星狀病毒。

禽星狀病毒分為四類(lèi)：鴨星狀病毒（DAstV）、火雞星狀病毒（TAstVs）、禽腎炎病毒（ANV）和雞星狀病毒（CAstV）。雞星狀病毒會(huì)引起肉雞生長(zhǎng)綜合征，尤其是以弱雛、死胚和孵化率下降為特征。雞星狀病毒還和生長(zhǎng)發(fā)育障礙綜合征相聯(lián)系。德國(guó)和英國(guó)的研究者在白羽肉雞的腎臟和肝臟檢測(cè)到病毒，并且在有腸炎和生長(zhǎng)發(fā)育障礙癥狀的腸道和拭子中檢測(cè)到病毒。研究者還發(fā)現(xiàn)雞胚在孵化階段被該病毒感染會(huì)出現(xiàn)翅膀變綠、尿囊液增多以及卵黃吸收不全等癥狀并致死。巴西、波蘭、美國(guó)、英國(guó)、西班牙以及荷蘭對(duì)雞星狀病毒血清學(xué)分布都有報(bào)道，提示該病毒在全球都有感染和分布。但是迄今為止，中國(guó)還沒(méi)有該病毒的相關(guān)研究報(bào)道。

本研究使用ELISA方法對(duì)來(lái)自于中國(guó)21個(gè)省份1760份血清樣品進(jìn)行星狀病毒的檢測(cè)。這些樣品來(lái)源于85個(gè)不同種類(lèi)的群體，并且每一個(gè)群體有20-30個(gè)樣本。檢測(cè)雞星狀病毒抗體使用的商品化試劑盒是荷蘭百測(cè)（BioChek）公司生產(chǎn)。按照操作說(shuō)明，樣品進(jìn)行1:100倍稀釋后加入到包被板上，22-27℃條件下孵育30分鐘后用300ul洗液進(jìn)行四次洗板，然后每孔加入酶標(biāo)二抗。 孵育結(jié)束后每孔加入300ul洗液進(jìn)行四次洗板后，加入底物液和底物藥片溶解后的PNPP進(jìn)行顯色，22-27 ℃ 條件下孵育15分鐘。最后加入100ul終止液進(jìn)行終止。 405nm濾光片讀數(shù)，樣品OD/陽(yáng)性對(duì)照OD的S/P值計(jì)算，大于0.7（滴度967）以上認(rèn)為是陽(yáng)性。

所有的省份和群體用ELISA檢測(cè)的結(jié)果都是陽(yáng)性，并且個(gè)體血清學(xué)陽(yáng)性率為60.68%（表1），因?yàn)楫?dāng)前沒(méi)有雞星狀病毒疫苗的供應(yīng)，所以血清學(xué)上轉(zhuǎn)陽(yáng)意味著這些群體已經(jīng)自然感染了雞星狀病毒。

    雞星狀病毒在不同日齡的感染分布參考圖1。在0-7周齡的雞平均陽(yáng)性率在35.27%，但是8-10周齡，陽(yáng)性率上升至59.00%。14-16周齡陽(yáng)性率繼續(xù)上升至74.44%。隨著雞只日齡的增加，其陽(yáng)性率也高于平均的陽(yáng)性率。有報(bào)道稱(chēng)雞星狀病毒在肉雞群體普遍存在。在該研究中，我們的樣品來(lái)源于不同的群體，包括蛋雞、父母代蛋雞、肉雞、父母代肉雞和地方品種雞，它們的陽(yáng)性率分別為70.17%、89.00%，31.67%、59.05和45.79 %（圖2）。父母代蛋雞陽(yáng)性感染率最高，而商品肉雞是陽(yáng)性率最低的。這可能與飼養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)系。這些結(jié)果也說(shuō)明，在蛋雞群、父母代蛋雞群和地方品種雞群雞星狀病毒是廣泛存在的。

    實(shí)驗(yàn)室用雞星狀病毒感染SPF雞可以復(fù)制出痛風(fēng)綜合征。值得一提的是，雞腎炎病毒也是雞星狀病毒的一種，可以引起腎臟損傷，并且導(dǎo)致尿酸在體內(nèi)的各個(gè)組織中沉積。所以，除了禽腎炎病毒和傳染性支氣管炎外，雞星狀病毒也可以導(dǎo)致痛風(fēng)或者腎炎。

雞星狀病毒在體外很難生長(zhǎng)，所以分離該病毒很難。但是可以應(yīng)用大體病癥觀察和PCR或者熒光定量PCR來(lái)進(jìn)行診斷和監(jiān)測(cè)。當(dāng)前沒(méi)有一種有效的疫苗來(lái)預(yù)防雞星狀病毒的感染。所以預(yù)防和控制雞星狀病毒感染唯一手段就是嚴(yán)格的環(huán)境控制。為了消除該病毒的感染，被感染的群體要采取嚴(yán)格的生物安全措施，并對(duì)感染雞群進(jìn)行嚴(yán)格的消毒。

大多數(shù)雞星狀病毒的感染都是經(jīng)過(guò)糞口模式的水平傳播。病毒可以在雞群體中循環(huán)感染，雞只被星狀病毒感染后會(huì)出現(xiàn)一系列的血清學(xué)變化。這是中國(guó)第一篇關(guān)于雞星狀病毒血清學(xué)調(diào)查的文章，并且包括了不同類(lèi)型不同日齡的蛋雞和肉雞。我們的數(shù)據(jù)顯示，雞星狀病毒在中國(guó)感染非常普遍，應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)該病毒血清學(xué)分布的研究，以便研究防控策略。后續(xù)的研究可以對(duì)該病毒進(jìn)行分離鑒定并評(píng)估新疫苗的開(kāi)發(fā)。

英文鏈接：

The first serological investigation of Chicken astrovirus infection in China

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1045105617300386?via%3Dihub